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    NOD—SCID小鼠
    通过基因编辑技术，在非肥胖性糖尿病小鼠（NOD）品系上引入 Prkdc（Protein kinase, DNA activated, catalytic polypeptide，又名 scid）基因突变，从而建立的新型免疫缺陷小鼠。
    特征

    NOD-SCID 小鼠既拥有 C.B-17 SCID 小鼠的特征，缺乏适应性免疫系统，不再发生自发免疫性糖尿病，同 时还表现出 NOD 小鼠所具有的多种固有免疫缺陷，包括NK细胞活性低、没有溶血补体活性，骨髓发育缺陷，是一种更易于异种移植成功并可稳定应用的动物模型。

    NOD-SCID 小鼠的寿命一般为8-9个月，因此不适用于长期移植实验。

    用途

    同种和异种肿瘤移植：血清免疫球蛋白 Ig 泄漏率低于 SCID小鼠，肿瘤成活率高。

    血液学实验研究：建立人类白血病模型、干细胞移植、药物研究等研究。

    免疫学及炎症研究。

    糖尿病和肥胖研究： I型糖尿病。

    成长曲线
    生理生化数据

    品系周龄

    Nod-scid（8 weeks）

    指标

    单位

    雄

    雌

    白细胞计数

    WBC (109/L)

    0.55±0.06

    0.51±0.13

    嗜中性粒细胞计数

    Neu (109/L)

    0.39±0.05

    0.34±0.11

    淋巴细胞计数

    Lym (109/L)

    0.06±0.04

    0.1±0.03

    单核细胞计数

    Mon (109/L)

    0.06±0.02

    0.05±0.03

    嗜酸性粒细胞计数

    Eos (109/L)

    0.05±0.02

    0.02±0.01

    嗜碱性粒细胞计数

    Bas (109/L)

    0±0

    0±0

    嗜中性粒细胞比例

    Neu (%)

    70.11±5.65

    64.65±5.36

    淋巴细胞比例

    Lym (%)

    10.73±6.25

    19.9±6.16

    单核细胞比例

    Mon (%)

    9.97±3.45

    9.96±3.82

    嗜酸性粒细胞比例

    Eos (%)

    8.76±2.45

    5.1±2.09

    嗜碱性粒细胞比例

    Bas (%)

    0.43±0.28

    0.39±0.4

    红细胞计数

    RBC (1012/L)

    7.37±0.23

    7.46±0.39

    血红蛋白浓度

    HGB (g/L)

    119.7±2.41

    122.4±5.85

    红细胞压积

    HCT (%)

    36.75±0.88

    37.59±1.73

    平均红细胞体积

    MCV (fL)

    49.9±0.51

    50.41±0.56

    平均红细胞血红蛋白含量

    MCH (pg)

    16.24±0.35

    16.43±0.17

    平均红细胞血红蛋白浓度

    MCHC (g/L)

    325.5±5.18

    326.1±3.65

    红细胞分布宽度变异系数

    RDW-CV (%)

    11.99±0.22

    12.23±0.31

    红细胞分布宽度标准差

    RDW-SD (fL)

    24.45±0.51

    24.78±0.73

    血小板计数

    PLT (109/L)

    1271.7±95.64

    1306.3±127.53

    平均血小板体积

    MPV (fL)

    5.16±0.08

    5.02±0.09

    血小板体积分布宽度

    PDW

    15.07±0.05

    15.14±0.08

    血小板压积

    PCT (%)

    0.66±0.05

    0.65±0.06

     

    品系周龄

    Nod-scid（8 weeks）

    指标

    单位

    雄

    雌

    谷丙转氨酶

    ALT

    U/L

    31.32±18.77

    24.18±2.5

    谷草转氨酶

    AST

    U/L

    162.64±45.55

    146.83±18.72

    血清钙

    Ca

    mmol/L

    1.18±0.11

    0.94±0.17

    血清磷

    P

    mmol/L

    1.95±0.18

    1.47±0.11

    血糖

    Glu-G

    mmol/L

    2.45±0.63

    2.14±0.54

    碱性磷酸酶

    ALP

    U/L

    87.14±19.89

    103.19±37.29

    γ-谷氨酰转肽酶

    γ-GT

    U/L

    0.97±0.29

    0.73±0.28

    血清总蛋白

    TP

    g/L

    46.96±4.92

    48.34±2.87

    α-淀粉酶

    α-AMY

    U/L

    3075.46±877.11

    2768.7±222.15

    血清甘油三酯

    TG

    mmol/L

    980.58±497.77

    1201.62±286.56

    胆固醇

    TC

    mmol/L

    1506.22±206.32

    1273.58±364.31

    肌酸激酶

    CK

    U/L

    28.29±2.74

    29.97±1.92

    乳酸脱氢酶

    LDH

    U/L

    28.9±4.26

    23.23±2.85

    血清白蛋白

    ALB Ⅱ

    g/L

    9.58±2.13

    9.04±0.93

    脂肪酶

    LIP

    U/L

    1.95±0.1

    1.77±0.79

    尿素氮

    UREA

    mmol/L

    2.5±0.31

    2.66±0.64

    血清镁

    Mg Ⅱ

    mmol/L

    1.23±0.1

    1.2±0.13
    NOD-SCID小鼠淋巴细胞和NK细胞验证：

    基因鉴定报告：
    • 样本信息和目的：
    • 样本：
      NOD-SCID小鼠
    • 目的：
      确认NOD-SCID小鼠基因修饰类型
    • 靶基因：
      Prkdc Protein kinase, DNA activated, catalytic polypeptide
    • NCBI号：
      19090
    • NCBI链接：
      https//www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/19090
    方法和结果
     
    PRKDC（Protein kinase, DNA activated, catalytic polypeptide，DNA 依赖性蛋白激酶，又名 scid）能识别和传递 DNA 断裂损伤信号，当细胞 DNA 发生断裂损伤后，PRKDC 复合物就聚合在损伤位点上，随之蛋白激酶被活化，募集并磷酸化其下游的 DNA 修复蛋白启动 DNA 断裂修复。此外，PRKDC 在维持端粒稳定性，免疫蛋白质的位置特异性重组中也发挥重要的作用。Prkdc 基因位于小鼠 16 号染色体上，有 87 个外显子。
     
    查询 Prkdc 基因的转录本信息进行各外显子序列的检测，结果发现 Prkdc 基因有多个转录本，选择转录本 Prkdc-201 ENSMUST00000023352.8（如图 2）为模板进行引物设计、和测序比对： http://asia.ensembl.org/Mus_musculus/Tran/Sequence_cDNA?db=core;g=ENSMUSG00000022672; r=16:15637889-15842235; t=ENSMUST00000023352以 Prkdc 基因DNA为模板，设计 86 个外显子的扩增测序引 物，并把 PCR 产物进行 Sanger 测序，并于报告模板进行比对，结果显示 Prkdc 基因 85 号外显子显示出一个碱基的改变，其他有少量由于产物两端测序质量不好导致的序列不拟合被忽略掉。
     
    Prkdc 基因 85 号外显子发生单核苷酸改变（T 突变为 A）后，提前引入终止密码子，导致蛋白翻译提前终止。碱基突变后 PRKDC 蛋白预测将截短 83个氨基酸。
     
    结论
     
    斯贝福（北京）生物技术有限公司 NOD-SCID 小鼠的基因编辑类型为：Prkdc 基因 85 号外显子单碱基发生突变，提前引入终止密码子，导致蛋白翻译提前终止。
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